引言
開(kāi)學(xué)了,實(shí)驗(yàn)室原代細(xì)胞試驗(yàn)開(kāi)始了,我的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(培養(yǎng)箱溫度穩(wěn)定在37±0.5℃,細(xì)胞操作環(huán)境無(wú)菌,維持在25℃以上)正常,血清、培養(yǎng)基等也按照SOP正確添加,為啥細(xì)胞貼壁效果不太好?
一、原代細(xì)胞為什么要包被?
貼壁生長(zhǎng)成為原代細(xì)胞體外培養(yǎng)的核心條件,直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和細(xì)胞功能表達(dá)?。在原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要包被處理以增強(qiáng)貼壁能力。
二、如何選擇合適的包被材料?
為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需要,需要對(duì)培養(yǎng)器皿(培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)板)用不同的物質(zhì)包被后使用,既可以促進(jìn)細(xì)胞貼壁,也可以滿足一些特殊檢測(cè)需要。
PrimaCell™包被培養(yǎng)器皿(細(xì)胞貼壁好幫手)
針對(duì)原代細(xì)胞培養(yǎng)中的不同包被需求,齊氏生物特推出4大包被系列(見(jiàn)下圖):
(1)I 型膠原包被
I 型膠原是組織和器官中最常見(jiàn)的膠原蛋白,在皮膚、肌腱和骨骼中含量豐富。I型膠原是纖維形成膠原,是多細(xì)胞生物的細(xì)胞外基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)成份,由3條以甘氨酸-脯氨酸-羥脯氨酸三聯(lián)交替的膠原多肽鏈形成三螺旋結(jié)構(gòu),能促進(jìn)細(xì)胞的貼壁和增殖、特異性形態(tài)和功能表達(dá),常用于上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞等原代細(xì)胞的培養(yǎng)。
(2)多聚賴氨酸(Poly-Lysine)包被
多聚賴氨酸(Poly-Lysine)包被在細(xì)胞板表面,促進(jìn)細(xì)胞貼壁。貼壁依賴性細(xì)胞,通過(guò)包被帶正電的高分子多聚賴氨酸,可提高無(wú)血清或低血清培養(yǎng)環(huán)境下的細(xì)胞貼壁率,加強(qiáng)培養(yǎng)器皿表面對(duì)血清蛋白和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的吸附,加快細(xì)胞的增殖。多聚賴氨酸(Poly-Lysine)包被的培養(yǎng)板適用于神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的培養(yǎng),能夠促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞分化和神經(jīng)突的生長(zhǎng)。
(3)明膠包被
明膠是由膠原水解后得到的水溶性蛋白多聚體。齊氏生物PrimaCell™明膠包被板能促進(jìn)多種細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng),用于培養(yǎng)正?;蜣D(zhuǎn)染細(xì)胞,如血管內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、胰島細(xì)胞等。
該系列包被耗材具有以下特點(diǎn):
① 促進(jìn)多種細(xì)胞的貼壁;
② 預(yù)包被的明膠層節(jié)省實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的時(shí)間和費(fèi)用;
③ 批次間的穩(wěn)定性保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性。
(4)基質(zhì)膠包被
基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出基底膜基質(zhì), 其主要成分有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,還包含生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。
基質(zhì)膠用于制備各種要求的基底膜基質(zhì),用于細(xì)胞信號(hào)研究,諸如:鼠腎干細(xì)胞形成腎小管過(guò)程中生長(zhǎng)因子作用研究,鼠乳腺上皮干細(xì)胞的基因表達(dá)研究,transwell的腫瘤侵襲力實(shí)驗(yàn)等。
三、如何選擇供應(yīng)商?
※看品牌
齊氏生物作為一家資深細(xì)胞培養(yǎng)公司,歷經(jīng)15年的積累,公司細(xì)胞類產(chǎn)品線覆蓋經(jīng)工程改造的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系、具有良好生理相關(guān)性的原代細(xì)胞、以及血清、培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑、耗材,為您提供從基因功能研究、藥物篩選到毒性評(píng)價(jià)的一站式解決方案!
※看品控
齊氏生物4大系列包被培養(yǎng)器皿,每批均經(jīng)過(guò)細(xì)胞活力和培養(yǎng)性能測(cè)試,批次間良好的穩(wěn)定性。4℃保存,穩(wěn)定保存6個(gè)月。